Cellules endocrines de l'hypophyse

1   Le potentiel d'action calcique

1.1     Enregistrer un potentiel d'action calcique dans une cellule endocrine de l'hypophyse (configuration cellule-entière, mode courant imposé).

1.2     Démontrer qu'un courant calcium sensible au cobalt participe au potentiel d'action calcique. Caractériser ce courant Ca.

1.3     Est-ce qu'un courant Na sensible à la TTX participe aussi à ce potentiel d'action calcique ?

2   Le courant Ca de la phase de dépolarisation du potentiel d'action calcique

2.1     Enregistrer les courants Ca unitaires (iCa) en configuration patch excisée et en mode voltage imposé, en réponse à une série de sauts de potentiel dépolarisants. Pourquoi ce courant est-il entrant à des potentiels de membrane plus hyperpolarisés que +40 mV ? Vérifier qu'il s'agit d'un courant Ca ? Caractériser le type de courant Ca dont il s'agit (à travers des canaux de type L, N, P ou T) ? Déterminer l'intensité du courant unitaire et la durée moyenne d'ouverture du canal Ca à un potentiel de membrane donné. Construire la courbe iCa-V. Déterminer le potentiel d'inversion du courant unitaire et la conductance élémentaire du canal Ca.

2.2     Enregistrer les courants ICa en configuration cellule entière et en mode voltage imposé, en réponse à une série de sauts de potentiel dépolarisants. Vérifier qu'il s'agit d'un courant Ca. A quelle substance pharmacologique ce courant est-il sensible ? Construire la courbe ICa-V. Comparer à la courbe iCa-V. Interpréter.

3   Le courant big K qui participe à la phase de repolarisation du potential d'action calcique (un courant sensible au voltage et à la concentration intracellulaire en ions Ca)

3.1     Enregistrer le courant BK unitaire, en configuration patch excisée et en mode voltage imposé, en réponse à un saut de potentiel dépolarisant. Pourquoi ce courant est-il sortant à des potentiels de membrane plus dépolarisés que -50 mV ? Vérifier qu'il s'agit de l'enregistrement d'un courant sensible à la concentration intracellulaire en ions Ca. Déterminer à quelles substances pharmacologiques ce courant est sensible.

3.2     Déterminer l'intensité du courant unitaire et la durée moyenne d'ouverture du canal BK à un potentiel de membrane donné. Construire la courbe iBK-V. Déterminer le potentiel d'inversion du courant unitaire et la conductance élémentaire du canal BK.